革兰染色的步骤(革兰染色三步法)
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本文目录一览:
革兰氏染色步骤是什么?
革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤,具体操作方法是:
1、涂片固定。
2、草酸铵结晶紫染1分钟。
3、蒸馏水冲洗。
4、加碘液覆盖涂面染约1分钟。
5、水洗,用吸水纸吸去水分。
6、加95%酒精数滴,并轻轻摇动进行脱色,20秒后水洗,吸去水分。
7、蕃红染色液(稀)染1分钟后,蒸馏水冲洗。干燥,镜检。
原理
通过结晶紫初染和碘液媒染后,在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物,革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密,故遇乙醇或丙酮脱色处理时,因失水反而使网孔缩小,再加上它不含类脂,故乙醇处理不会出现缝隙;
因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内,使其仍呈紫色;而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差,在遇脱色剂后,以类脂为主的外膜迅速溶解,薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出,因此通过乙醇脱色后仍呈无色,再经沙黄等红色染料复染,就使革兰氏阴性菌呈红色。
以上内容参考:百度百科-革兰氏染色
简述革兰氏染色的操作步骤
革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤,具体操作方法是:
1)涂片固定。
2)草酸铵结晶紫染1分钟。
3)蒸馏水冲洗。
4)加碘液覆盖涂面染约1分钟。
5)水洗,用吸水纸吸去水分。
6)加95%酒精数滴,并轻轻摇动进行脱色,20秒后水洗,吸去水分。
7)蕃红染色液(稀)染1分钟后,蒸馏水冲洗。干燥,镜检。
扩展资料
革兰氏染色法的意义就在于鉴别细菌,把众多的细菌分为两大类,革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
在治疗上,大多数革兰氏阳性菌都对青霉素敏感(结核杆菌对青霉素不敏感):大多数化脓性球菌都属于革兰氏阳性菌,它们能产生外毒素使人致病,可以选择青霉素族,头孢曲松钠等。
革兰氏阴性菌,大多数肠道菌多属于革兰氏阴性菌,它们产生内毒素,靠内毒素使人致病。而革兰氏阴性菌则对青霉素不敏感,可以选择氟喹诺酮类药物如诺氟沙星,左氧氟沙星等,也可以选择大环内酯类比如克拉霉素、罗红霉素等。所以首先区分病原菌是革兰氏阳性菌还是阴性菌,在选择抗生素方面意义重大。
参考资料来源:百度百科-革兰氏染色
参考资料来源:百度百科-革兰氏染色法
简述革兰氏染色的步骤和结果
革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤。结果:革兰氏阳性菌呈蓝紫色,革兰氏阴性菌呈红色。
革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌在化学组成和生理性质上有很多差别,染色反应不一样。现在一般认为革兰氏阳性菌体内含有特殊的核蛋白质镁盐与多糖的复合物。
它与碘和结晶紫的复合物结合很牢,不易脱色,阴性菌复合物结合程度底,吸附染料差,易脱色,这是染色反应的主要依据。
扩展资料
阳性菌菌体等电点较阴性菌为低,在相同pH条件下进行染色,阳性菌吸附碱性染料很多,因此不易脱去,阴性菌则相反。所以染色时的染色液pH和染色时间等条件要严格控制。
例如,在强碱的条件下进行染色,两类菌吸附碱性染料都多,都可呈正反应; pH很低时,则都可呈负反应。此外,两类菌的细胞壁等对结晶紫-碘复合物的通透性也不一致,阳性菌透性小,故不易被脱色,阴性菌透性大,易脱色。所以脱色时间、脱色方法也应严格控制。
参考资料来源:百度百科-革兰氏染色
革兰染色的实验步骤
革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤,具体操作方法是:
1、涂片固定。
2、草酸铵结晶紫染1分钟。
3、蒸馏水冲洗。
4、加碘液覆盖涂面染约1分钟。
5、水洗,用吸水纸吸去水分。
6、加95%酒精数滴,并轻轻摇动进行脱色,20秒后水洗,吸去水分。
7、蕃红染色液(稀)染1分钟后,蒸馏水冲洗。干燥,镜检。
扩展资料:
革兰染色反应的原理:
革兰染色反应是细菌分类和鉴定的重要性状。它是1884年由丹麦医师Gram创立的。
革兰染色法(Gram stain)不仅能观察到细菌的形态,而且还可将所有细菌区分为两大类:染色反应呈蓝紫色的称为革兰氏阳性细菌,用G+表示;染色反应呈红色(复染颜色)的称为革兰氏阴性细菌,用G-表示。
细菌对革兰氏染色的不同反应,是由于它们细胞壁的成分和结构不同而造成的。
革兰氏阳性细菌的细胞壁主要是由肽聚糖形成的网状结构组成的,在染色过程中,当用乙醇处理时,由于脱水而引起网状结构中的孔径变小,通透性降低,使结晶紫-碘复合物被保留在细胞内而不易脱色,因此,呈现蓝紫色。
革兰氏阴性细菌的细胞壁中肽聚糖含量低,而脂类物质含量高,当用乙醇处理时,脂类物质溶解,细胞壁的通透性增加,使结晶紫-碘复合物易被乙醇抽出而脱色,然后又被染上了复染液(番红)的颜色,因此呈现红色。
革兰染色步骤正确顺序是什么?
革兰染色的正确顺序是结晶紫、碘液、95%乙醇、稀释复红。
在结晶紫初染和碘液媒染之后,在这个细胞壁里面,细胞壁里面产生了复合物,这个时候由于细胞壁是非常厚的,而且肽聚糖网层又多又密,在遇到乙醇脱色处理的时候,网孔变小了。
这个时候乙醇处理就没有缝隙出现,这个时候相关的复合物,在细胞壁里面就会牢牢的停留住,不过这个时候仍然会呈现紫色,后面遇到脱色剂了之后有复合物溶出,虽然已经过了驼色的处理但是仍然是没有颜色,后面再经过红色染料复染,革兰氏阴性菌就变成了红色。
扩展资料
革兰氏染色反映是细菌分类和评定的必要性状。它是1884年由荷兰医生Gr二开创的。
革兰氏染色法(Gram stain)不但能观查到细菌的形态并且还可将全部病菌区别为两类:上色反映呈紫蓝色的称之为革兰氏阳性病菌,用G表明;上色反映呈鲜红色(复染色调)的称之为革兰氏阳性菌呈阴性病菌,用G一表明。
病菌针对革兰氏染色的不一样反映,是因为他们植物细胞的成份和构造不一样而导致的。
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