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抗性基因(抗性基因要在启动子和终止子之间吗)

2025-09-17 13:53:56 作者:wangsihai

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基因重组常用的抗性基因是

1、抗性基因是选择基因的一种,所以属于标记基因。基因工程中用于选择的抗性基因一般在载体上。

2、常用于基因重组的质粒是pBR322质粒,因为其基因测序已经完成,而且它携带了两个标记基因,一个是氨苄青霉素抗性基因Apr,另一个是四环素抗性基因Tetr。

3、受体是否具有青霉素抗性只能证明受体细胞获得了质粒,至于是有没有连接上外源DNA片段的质粒则是一般不知道的。因此一般使用双选法。即有一个标记基因是抗性基因,另一个基因常用的是lacZ基因。

抗性基因在质粒上,怎样起筛选作用

1、把目的基因连接到带有抗性基因的质粒上以后,就可以根据抗性来筛选带有该质粒的大肠杆菌,筛选出的大肠杆菌被认为是同时带有了目的基因,即该菌中成功导入了目的基因。

2、以卡那霉素抗性基因Kanr为例,Kanr编码蛋白APH(3)-Ⅱ对卡那霉素具有抗性,这样在筛选培养基上添加卡那霉素,能够存活下来的就是具有卡那霉素抗性基因的质粒。

3、如果受体细胞是细菌的话,可以挑选单克隆,进行菌液PCR。引物设计在抗性基因中,看pcr结果是否呈阳性,即能p出条带。最准确的,还是酶切鉴定。

4、如果是做基因克隆的话,可以直接用蓝(兰)白斑筛选。

抗性基因怎么作用

抗性基因或标记基因在质粒上是为了检验质粒是否被转入菌体中.以卡那霉素抗性基因Kanr为例,Kanr编码蛋白APH(3′)-Ⅱ对卡那霉素具有抗性,这样在筛选培养基上添加卡那霉素,能够存活下来的就是具有卡那霉素抗性基因的质粒。

抗性基因本身应该是从对抗生素具有特异抗性的细菌的基因组中得到的,分子克隆中很常用,所以基本上质粒载体上都已经构建了。功能是作为载体成功转入的标记。

如果用含有抗生素的培养基培养,没有导入抗性基因质粒的大肠杆菌是不能存活的。导入了带抗性基因的质粒以后才能存活。

氨苄青霉素是抗炎治疗的,预防性的防止感染发生。氨苄青霉素抗性基因是基因操作中使用最广泛的选择标记,绝大多数在大肠杆菌中克隆的质粒载体带有该基因。

当然不是,首先,我们知道四环素类抗生素作用机理是阻止细菌tRNA与细菌核糖体结合从而抑制细菌蛋白质的合成。